两种灵芝多糖在抗肿瘤及免疫方面的作用--南京中医药大学陆茵

作者:灵芝 发布于:2013-2-28 14:12 分类:药理研究

1 实验方法与结果

1.1 多糖对实体型荷瘤小鼠肿瘤(B16BL6)生长的影响作用

C57BL6小鼠90只,雌雄各半,随机分为9组,每组10只,分别为多糖PI组(0.050.10.2g·kg-1)、多糖PII组(0.050.10.2 g·kg-1)、云芝多糖组(1.65g·kg-1)、5-FU组(0.02g·kg-1)、模型组(等体积NS),除5-FU组腹腔注射给药外,其余各组均灌胃给药。以0.25%胰酶消化贴壁生长良好的B16BL6黑色素瘤细胞,加培养液800rpm离心弃上清,再以无血清培养基混悬肿瘤细胞,调整细胞数。然后于每只小鼠右侧腹股沟皮下处接种肿瘤细胞悬液0.2ml(106),接种次日开始灌胃给药,连续20天,每日观察记录小鼠腹股沟皮下处肿瘤生长情况、小鼠活动状态以及小鼠死亡情况。给药结束后处死小鼠,剥取分离瘤组织,以电子天平称重,记录瘤重。将瘤组织于50下干燥24小时,记录干重。计算抑瘤率。

抑瘤率=1-给药组瘤重/模型组瘤重)×100%

8-13多糖对实体型(B16BL6)荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用(X±SD

组别

剂量(g/kg

实体瘤重(湿重)

抑瘤率(%

实体瘤重(干重)

模型组

5-FU

PI-1

PI-2

PI-3

PII-1

PII-2

PII-3

云芝多糖

——

0.02

0.20

0.10

0.05

0.20

0.10

0.05

1.65

5.399±1.205

1.218±0.439**

3.711±1.092*

4.309±0.800*

4.546±2.060

4.430±0.941*

4.397±1.207

6.202±1.190

4.266±1.180

100

77.4

31.3

20.2

15.8

17.9

18.6

——

21.0

1.715±0.207

0.959±0.068**

1.373±0.192**

1.434±0.243*

1.445±0.369

1.478±0.111*

1.469±0.362

1.737±0.183

1.470±0.325

注:*P<0.05**P<0.01

在腹股沟处接种B16BL6肿瘤细胞后约6天,开始有可触及之肿块,再往后肿块逐渐增大,到20天模型组肿块已大如桃核,肿瘤在体生长良好。多糖给药组小鼠腹股沟处肿块生长与模型组小鼠接近,其生长速度较慢,表现为多糖PIPII各剂量(除PII低剂量外)瘤重均较模型组小,其中PI高中剂量、PII高剂量瘤重与模型组比较有显著性差异(P<0.01P<0.05),说明两多糖在抑制移植性实体型肿瘤方面都有一定作用,以多糖PI为佳。

1.2  多糖对腹水型荷瘤小鼠肿瘤(S180)生长的影响作用

取处于对数生长期的S180细胞,以0.25%胰酶消化,再以无血清培养基稀释成细胞悬浮,将此细胞悬液腹腔注射接种到ICR小鼠体内,层流架中饲养观察,待小鼠腹部胀大时(即小鼠体内肿瘤细胞已迅速增殖),准备第二次小鼠接种。

ICR小鼠90只,雌雄各半,随机分为9组,每组10只,分别为多糖PI组(0.050.10.2g·kg-1)、多糖PII组(0.050.10.2g·kg-1)、云芝多糖组(0.4g·kg-1)、5-FU组、模型组(等体积NS),除5-FU组腹腔注射给药外,其余各组均灌胃给药。

取上述接种过并且肿瘤生长正常的ICR小鼠,抽取腹水,以生理盐水稀释,制成肿瘤细胞悬液并调整细胞数,每只小鼠腹腔注射接种肿瘤细胞悬液0.2ml(106),接种次日开始给药,连续20天,每日观察记录小鼠腹腔情况、活动状况以及小鼠死亡情况。根据小鼠死亡率采用卡方检验统计结果。


8-14 腹水型荷瘤小鼠肿瘤(S180)生长的抑制作用(X±SDn=10

组别

(g·kg-1)

死亡率

x2

模型组

5-Fu

PI-1

PI-2

PI-3

PII-1

PII-2

PII-3

云芝多糖

——

0.02

0.20

0.10

0.05

0.20

0.10

0.05

1.65

100%

20%

50%

60%

80%

70%

80%

100%

100%

——

13.33**

6.67**

5.00*

2.22

3.52

2.22

——

——

注:*P<0.05**P<0.01

接种腹水型S180肿瘤细胞的小鼠在十天后表现为腹部胀大,精神萎靡,活动减少,并逐渐开始出现死亡,在20天左右模型组小鼠全部死亡,多糖给药小鼠亦出现上述表现,但其死亡率有所下降,其中多糖PI高中剂量与模型组比较有明显差异,显示其能延缓小鼠的死亡时间,对肿瘤有一定的抑制作用。

标签: 抗肿瘤 灵芝多糖 免疫

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